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當(dāng)前位置:首頁 > 資料下載 > cytoskeleton AD99-A說明書

cytoskeleton AD99-A說明書

發(fā)布時(shí)間:2018/8/17      點(diǎn)擊次數(shù):1196

 

Cytoskeleton,Inc。很高興為藥物篩選,信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞骨架研究提供廣泛的試劑盒和產(chǎn)品。我們專注于生產(chǎn)純化蛋白質(zhì)和易于使用的試劑盒,以研究生物化學(xué)和細(xì)胞過程。我們的試劑盒可用于少量樣品,用于基礎(chǔ)研究或小屏幕(Biochem Kits™),也可用于大屏幕的高通量樣品CytoDYNAMIX Screens™)。

除了我們現(xiàn)有的產(chǎn)品,我們還在產(chǎn)品線中為微管,微管蛋白,運(yùn)動(dòng)蛋白,小G蛋白效應(yīng)物,GAP,GEF和其他幾種蛋白提供藥物篩選服務(wù)。

 

Binding Proteins

結(jié)合蛋白質(zhì)

· 概述

· 關(guān)于

· CITATIONS

· 常見問題解答

 

測定所有肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白(ABP)以確保其活性與公布的值相當(dāng)。測定因產(chǎn)品而異,包括F-肌動(dòng)蛋白切斷測定,F(xiàn)-肌動(dòng)蛋白激活的ATP水解和肌動(dòng)蛋白聚合測定。顯示了測量WASP VCA結(jié)構(gòu)域蛋白在肌動(dòng)蛋白聚合中的作用(右)。

 

Cytoskeleton,Inc。銷售一系列純化的肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白。所有Cytoskeleton的肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白都具有高純度,并經(jīng)過嚴(yán)格的生物活性測試。細(xì)胞骨架還為肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白研究提供肌動(dòng)蛋白,抗體和試劑盒。

 

由Arp2 / 3和WASP VCA結(jié)構(gòu)域刺激的肌動(dòng)蛋白聚合。試劑盒BK003用于研究Arp2 / 3(Cat。#RP01)和WASP VCA(Cat。#VCG03)結(jié)構(gòu)域?qū)?dòng)蛋白聚合的影響

肌動(dòng)蛋白與細(xì)胞中的多種蛋白質(zhì)相互作用
*,F(xiàn)-和G-肌動(dòng)蛋白與細(xì)胞中的多種蛋白質(zhì)相互作用(14)??。目前有超過150種已知的肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白(ABP),其占細(xì)胞蛋白的約25%。ABP在肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架上賦予大量功能多樣性,其涉及諸如肌肉收縮,唇形突破,細(xì)胞運(yùn)動(dòng),胞質(zhì)分裂和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的過程。研究這些過程如何調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白絲功能和動(dòng)力學(xué)是一個(gè)重要且不斷增長的研究領(lǐng)域。

可以通過使用生物化學(xué),遺傳學(xué)和免疫學(xué)方法分離和研究肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白。因?yàn)榇嬖诔^50種類型的肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白,所以用于鑒定它們的方法及其功能/活性也是多種多樣的。肌動(dòng)蛋白親和柱通常用于親和純化ABP,無論它們是F-或G-肌動(dòng)蛋白結(jié)合。可以通過利用芘肌動(dòng)蛋白熒光的聚合增強(qiáng)來進(jìn)行顯示潛在ABP影響肌動(dòng)蛋白動(dòng)力學(xué)的簡單測定(參見測量肌動(dòng)蛋白聚合物部分)。這種性質(zhì)的研究有助于鑒定新的肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白。有幾篇值得一讀的關(guān)于識(shí)別和量化新肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白的可能方法的評(píng)論(15,16,17)?

問題1:哪種肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白(ABP)可用作F-肌動(dòng)蛋白結(jié)合對(duì)照? 

答案1:肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白α-輔肌動(dòng)蛋白(Cat。#AT01)是一種F-肌動(dòng)蛋白結(jié)合和交聯(lián)蛋白,使其可用作F-肌動(dòng)蛋白結(jié)合研究的對(duì)照。它的Kd是1μM,這意味著在該濃度下發(fā)生50%結(jié)合。因此,我們的目標(biāo)是使用 2μM的α-肌動(dòng)蛋白作為結(jié)合測定中的陽性對(duì)照。在結(jié)合反應(yīng)中,2μM濃度的α-輔肌動(dòng)蛋白相當(dāng)于0.23μg/μl。此外,α-輔肌動(dòng)蛋白對(duì)pH敏感,其高親和力發(fā)生在pH 7.0。

 

問題2:Cytoskeleton的肌球蛋白或重的meromyosin是否具有F-肌動(dòng)蛋白活力? 

答案2:遺憾的是,我們不會(huì)出售運(yùn)動(dòng)級(jí)肌球蛋白或重肌紅蛋白用于肌動(dòng)蛋白運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)。我們發(fā)現(xiàn)質(zhì)量控制測試非常難以復(fù)制,因此我們無法充分確保試劑的質(zhì)量。因此,肌球蛋白(Cat。#MY02MY03)和重型meromyosin蛋白(Cat。#MH01)不推薦用于F-肌動(dòng)蛋白運(yùn)動(dòng)測定。已經(jīng)測試過這些試劑的客戶在運(yùn)動(dòng)方面沒有取得很好的成功,因此我們不建議購買樣品進(jìn)行測試。如果需要運(yùn)動(dòng)級(jí)肌動(dòng)蛋白或重型meromyosin,我們建議遵循原始方案(Kron和Spudich,1985)并在液氮中冷凍100μl等分試樣以確保穩(wěn)定性。

    參考文獻(xiàn):  SJ Kron和JA Spudich,1985年。熒光肌動(dòng)蛋白絲在固定在玻璃表面的肌球蛋白上移動(dòng)。PNAS,83,6272-6276。

 

肌動(dòng)蛋白(純度> 99%):牛心肌

1x1毫克(Cat。#AD99-A)

5x1毫克(Cat。#AD99-B)

產(chǎn)品用途包括

· 鑒定和表征心肌肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白

· 體外心肌肌動(dòng)蛋白聚合研究

 

材料:
牛心肌肌動(dòng)蛋白作為凍干粉末提供。當(dāng)一個(gè)小瓶在1ml肌動(dòng)蛋白單體緩沖液復(fù)原:5.0毫摩爾Tris-HCl pH 8.0中,0.2毫米氯化鈣2,0.2mM的ATP和0.5mM DTT,它是在1.0毫克/毫升的終濃度。

純度:
通過在SDS-PAGE凝膠上掃描蛋白質(zhì)的光密度測定來確定純度。樣品純度> 99%。

生物活性:
生物活性以三種方式確定。種方法利用芘肌肉肌動(dòng)蛋白作為聚合的熒光指示劑(使用1:10比例的AP05至AD99)。第二種是通過高速離心沉淀肌動(dòng)蛋白聚合物。第三種方法通過特異性抑制DNase活性來測量單體的完整性。生物活性> 90%。

問題1:牛心肌肌肉肌動(dòng)蛋白的同種型組成是什么?

答案1:  牛心肌肌動(dòng)蛋白(Cat。#AD99)由84%的α-心肌細(xì)胞和16%的α-骨骼肌動(dòng)蛋白同種型組成。 

 

問題2:當(dāng)心肌肌動(dòng)蛋白沒有可用的芘結(jié)合物時(shí),如何用芘測定法測量肌動(dòng)蛋白聚合? 

答案2:  為了檢查未標(biāo)記的心肌肌動(dòng)蛋白(Cat。#AD99)的聚合,請(qǐng)點(diǎn)擊此處查看使用過量未標(biāo)記[心肌]肌動(dòng)蛋白加10%芘標(biāo)記的骨骼肌肌動(dòng)蛋白的聚合方案。芘肌肉肌動(dòng)蛋白本身不會(huì)以該測定中使用的濃度聚合,因此該反應(yīng)依賴于未標(biāo)記的心肌肌動(dòng)蛋白(Cat。#AD99)用于F-肌動(dòng)蛋白形成。以這種方式,芘標(biāo)記的肌肉肌動(dòng)蛋白被吸收并聚合以充當(dāng)用于聚合未標(biāo)記的肌動(dòng)蛋白的報(bào)道分子,其以更高的濃度存在。

Butler SC,et al。海藻中的pectenotoxins對(duì)各種肌動(dòng)蛋白異構(gòu)體聚合的抑制作用。毒理學(xué)。體外。26,493-499。

Fressinaud C.,et al。軸突細(xì)胞骨架蛋白在體外特異性調(diào)節(jié)少突膠質(zhì)細(xì)胞的生長和分化。神經(jīng)化學(xué)雜志。詮釋。60,78-90。

Orlova A.,et al。肌球蛋白結(jié)合蛋白C的N-末端結(jié)構(gòu)域可以多態(tài)性結(jié)合F-肌動(dòng)蛋白。J. Mol。細(xì)胞。412,379-386。

Debold EP,et al。與增生性和擴(kuò)張性心肌病相關(guān)的人肌動(dòng)蛋白突變在體外表現(xiàn)出明顯的細(xì)絲調(diào)節(jié)特性。J. Mol。細(xì)胞。心肺。48,286-292。

Passarelli C.,et al。分離的肌原纖維對(duì)體外谷胱甘肽化的易感性:對(duì)肌肉功能的潛在相關(guān)性。細(xì)胞骨架。67,81-89。

 

 

 

 

貨號(hào)

品名

規(guī)格

品牌

BK165-S

Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK165

Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK163-S

Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK163

Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK160-S

Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK160

Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK162-S

Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK162

Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK161-S

Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK161

Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

AAC04-Beads

Acetyl-Lysine Affinity Beads

ea

cytoskeleton

APY03-Beads

Anti-Phosphotyrosine Affinity Beads

ea

cytoskeleton

ASM11-Beads

SUMOylation 1 Affinity Beads

ea

cytoskeleton

ASM24-Beads

SUMOylation 2/3 Affinity Beads

ea

cytoskeleton

UBA01-Beads

Ubiquitination Affinity Beads

ea

cytoskeleton

CIG02-Beads

Acetyl-Lysine Control Beads

ea

cytoskeleton

CIG03-Beads

SUMO1 IP Control Beads

ea

cytoskeleton

CIG01-Beads

IgG Control Beads

ea

cytoskeleton

CUB02-Beads

Ubiquitination Control Beads

ea

cytoskeleton

BLR01

BlastR™ Rapid Lysate Prep Kit

ea

cytoskeleton

BLR02

BlastR™ Rapid Filtration Kit

ea

cytoskeleton

AAC02

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (7B1)

ea

cytoskeleton

AAC03

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1)

ea

cytoskeleton

AAC03-HRP

Acetyl Lysine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1)

ea

cytoskeleton

AAC01

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (3C6.08.20)

ea

cytoskeleton

APY03

Phosphotyrosine Antibody Mouse Monoclonal (27B10)

ea

cytoskeleton

APY03-HRP

Phosphotyrosine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (27B10)

ea

cytoskeleton

ASM01

SUMO1 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 5D8B16)

ea

cytoskeleton

ASM24

SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 11G2)

ea

cytoskeleton

ASM23

SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3)

ea

cytoskeleton

ASM23-HRP

SUMO-2/3-HRP Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3)

ea

cytoskeleton

AUB01

Ubiquitin Antibody Mouse Monoclonal

ea

cytoskeleton

AUB01-HRP

Ubiquitin-HRP Antibody Mouse Monoclonal

ea

cytoskeleton

PHDG1

Acti-stain 488 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDH1

Acti-stain 555 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDN1

Acti-stain 670 phalloidin

ea

cytoskeleton

BK001

Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

BK003

Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

AKL95

Actin protein (>95% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AD99

Actin protein (>99% pure): bovine cardiac muscle

ea

cytoskeleton

AS99

Actin protein (>99% pure): chicken gizzard muscle

ea

cytoskeleton

AKL99

Actin protein (>99% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AKF99

Actin protein (pre-formed filaments): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AP05

Actin protein (pyrene labeled): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

APHR

Actin protein (rhodamine): human platelet

ea

cytoskeleton

AR05

Actin protein (rhodamine): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AT01

Alpha-actinin protein: rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

RP01P

Arp2/3 protein complex: porcine brain

ea

cytoskeleton

CS-TFC01

Cardiac Thin Filament Complex (CTFC)

ea

cytoskeleton

CF01

Cofilin 1 protein: human recombinant

ea

cytoskeleton

HPG6

Gelsolin protein: Homo sapiens recombinant

ea

cytoskeleton

MH01

Heavy meromyosin protein

ea

cytoskeleton

CS-MH03

Heavy Meromyosin Protein (HMM Fragment)

ea

cytoskeleton

CS-MYS03

Myosin - cardiac S1 fragment

ea

cytoskeleton

CS-MYS04

Myosin - skeletal muscle S1 fragment

ea

cytoskeleton

CS-MYS05

Myosin - smooth muscle S1 fragment

ea

cytoskeleton

MY02

Myosin II protein: rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

MY03

Myosin protein: bovine cardiac muscle

ea

cytoskeleton

PR02

Profilin 1 protein: Untagged, human recombinant

ea

cytoskeleton

PHDR1

Rhodamine Phalloidin

ea

cytoskeleton

CY-SC001

SiR-Actin Kit

ea

cytoskeleton

CY-SC013

SiR700-Actin Kit

ea

cytoskeleton

VCG03

WASP protein VCA domain: GST tagged: human

ea

cytoskeleton

 

 

 

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7:我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批發(fā),歡迎合作。

 


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