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Agrisera公司于1980年在瑞典成立，Agrisera公司一直致力于發展科學研究所需的蛋白抗體研發與銷售，產品主要有：多種植物蛋白酶抗體，呼吸作用（線粒體）相關蛋白的多克隆抗體，Arabidopsis thaliana，Chlamydomonas reinhardtii ，以及其它一些較為稀有的蛋白抗體

ADGP | ADP-glucose pyrophosphorylase

ADGP | ADP-葡萄糖焦磷酸化酶

AS11 1739 | 克隆性：多克隆 | 主體：兔子 | 反應物種：A.thaliana，C. reinhardtii，H. vulgare，Polytomella sp。，Z. mays

應用實例

用蛋白質提取緩沖液PEB（AS08 300）提取10μg來自擬南芥 （1），Hordeum vulgare （2），Zea mays （3）總蛋白的總蛋白。樣品用1X樣品緩沖液（NuPAGE LDS樣品緩沖液（Invitrogen），補充有50mM DTT并在70℃加熱5分鐘，并在加載前保持在冰上，蛋白質樣品在NuPAGE4-12％Tris-雙凝膠（Invitrogen）LDS-PAGE，并使用槽轉移在PVDF上印跡1小時至1.5小時。在2％封閉試劑（GE RPN 2125; Healthcare）或溶解于20mM Tris的5％非脂肪乳中轉移后，在室溫攪拌下，將含有0.1％（v / v）吐溫-20（TBS-T）的137mM氯化鈉pH7.6培養1小時，將印跡以1：5000稀釋（封閉試劑）在室溫下攪拌1小時，傾出抗體溶液，短暫漂洗2次，然后用TBS-T在室溫下攪拌洗滌1×15分鐘和3×5分鐘，將印跡在二抗（抗兔IgG辣根過氧化物酶偶聯，推薦二抗AS09 602）稀釋t 在室溫下攪拌1?25 000封閉試劑1小時。印跡如上所述洗滌。使用TMA-6（Lumigen）檢測試劑根據制造商的說明書將印跡顯影5分鐘。使用CCD成像儀（FluorSMax，Bio-Rad）和Quantity One軟件（Bio-Rad）獲得印跡圖像。

進行2D凝膠電泳以排除該抗體對Rubisco的交叉反應性

將WT-Col-0 擬南芥葉子在液氮中冷凍，將可溶性蛋白質在含有50mM HEPES，5mM NaCl和10mM MgCl 2的緩沖液中提取。通過非還原藍色天然PAGE（5-12.5％）分離10μg和17μg天然蛋白質復合物，然后通過還原SDS-PAGE（15％用6M尿素）在第二維中進一步分離，并吸印1小時至使用Höefer半干吸墨紙的PVDF膜。在室溫（RT）攪拌下，用TTBS中的2％牛奶將斑塊封閉3小時。將印跡在+ 4℃下以1：2000稀釋過夜孵育一次抗體。傾析抗體溶液，并在室溫下用TTBS在攪拌下將印跡洗滌3×5分鐘。將印跡在室溫下攪拌下，在1％乳/ TTBS中稀釋至1:25000的二抗（來自Agrisera AS09602的抗兔IgG 抗性馬匹蘿卜過氧化物酶）中溫育2小時。印跡在TTBS中在TTBS中洗滌3×5分鐘，并在室溫下用TBS洗滌1x5分鐘，并用ECL根據制造商的說明書顯影5分鐘。曝光時間為30秒。

來自芬蘭圖爾庫大學的Lauri Nikkanen感謝

藻類樣品的




蛋白質印跡來自萊茵衣藻菌株CC-124 （1），衣藻衣藻菌株CC43-48（STA6）（2）和Polytomella sp。的總蛋白質（40μg）Pringsheim 198.80 （3）在5-12％丙烯酰胺/ 6M尿素SDS-PAGE上分離，并印跡到硝酸纖維素膜上。在攪拌下，在含有5％低脂奶的T-TBS（0.1％Tween in Tris Buffer Saline）中，在室溫（RT）下1小時封閉印跡。將印跡在1：2 500的稀釋度下在*抗體中在攪拌下在室溫下孵育1小時。傾析抗體溶液，并在T-TBS，RT攪拌下將印跡洗滌兩次15分鐘。將印跡在稀釋至1:25000的二次抗體（山羊抗兔IgG，偶聯的辣根過氧化物酶，Agrisera，AS09602）中，在室溫下攪拌孵育 1小時。如上所述洗滌印跡并使用自制的增強化學發光系統（Durrant，Nature 346：297,1990）進行顯影。使用CCD成像儀（ImageQuant LAS4000）獲得印跡圖像。

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