DNA污染去除酶說明書

英文名稱：HL-dsDNase

中文名稱：熱敏雙鏈特異性核酸酶

產(chǎn)地：挪威

品牌：ArcticZymes

應(yīng)用：去除RNA樣品中的基因組DNA污染

儲存和運(yùn)輸：-20度存儲 干冰運(yùn)輸

有效期：-20度3年

單位定義：1單位指在25℃標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件下，每分鐘OD260增加0.001（約每分鐘消化1pmol核酸底物）所需的酶量。

簡介：制備RNA時(shí)基因組DNA污染將會干擾下游PCR或Northern Blot實(shí)驗(yàn)。用RNase-free的DNase消化DNA也會導(dǎo)致RNA降解。熱敏雙鏈DNA特異性核酸酶(Heat labile ds-DNA-specific Nuclease，又名ezDNase或HL dsDNase)，為雙鏈特異性核酸酶。其特異性的識別降解雙鏈DNA，對單鏈DNA或RNA幾乎無活性，其降解dsDNA的能力比ssDNA高~5000倍。除此外，該雙鏈DNA特異性核酸酶降解雙鏈DNA的能力比bovine DNaseI高~30倍，因此特別適用于去除RNA樣品中的基因組DNA污染。該熱敏型雙鏈DNA核酸酶可將DNA降解為2~8bp的產(chǎn)物，且55℃ 5min可使該酶不可逆失活，同時(shí)又能保持RNA和ssDNA的穩(wěn)定性，因此產(chǎn)物無需再純化，可直接用于后續(xù)反應(yīng)。同時(shí)該酶與M-MLV和AMV的反應(yīng)Buffer都是兼容的，可應(yīng)用于反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中去除樣本中基因組DNA的污染，提高反轉(zhuǎn)錄效率。

注意事項(xiàng)：

（1）1×dsDNase Buffer：20mM Tris-HCl pH8, 2mM MgCl2。該酶需要1~3mM MgCl2。
（2）該酶對DTT敏感，任何反應(yīng)體系中不得包含DTT。
（3）通常在RT反應(yīng)中的用量為0.1~0.5U/20 μl體系。
（4）任何濃度的SDS、鹽酸胍、β-mercaptoethanol或高鹽離子（>300mM）均抑制該酶活性。
（5）該酶的宜反應(yīng)溫度為25~37℃，42℃ 30min后活性損失70%。

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