美國(guó)POLYSCIENCES公司成立于1961年，主要生產(chǎn)和經(jīng)營(yíng)LIFE SCIENCES生命科學(xué)（膠體金,不含甲醛的甲醇等），病理學(xué)和顯鏡學(xué) 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產(chǎn)品。polysciences公司是世界上較大較全的多聚化合物供應(yīng)商,同時(shí)是的免疫學(xué),組織化學(xué)試劑耗材供應(yīng)商.

  POLYSCIENCES   21759-1現(xiàn)貨

Nylon Wool Fiber T細(xì)胞分離尼龍毛柱

產(chǎn)品簡(jiǎn)介】

　尼龍毛柱是免疫學(xué)中一種用于分離T細(xì)胞的分離柱。憂郁在研究體內(nèi)及體外的免疫系統(tǒng)時(shí)，分離淋巴細(xì)胞群是一個(gè)關(guān)鍵步驟。

描述

尼龍羊毛纖維可用于從外周血中分離白細(xì)胞并從B細(xì)胞中分離T細(xì)胞。粒細(xì)胞和B細(xì)胞粘附在纖維上，而T細(xì)胞和其他細(xì)胞則不粘。

準(zhǔn)備使用，在10cc注射器中使用500mg預(yù)包裝尼龍羊毛纖維。

10cc預(yù)裝注射器Gamma處理25.0 - 40.0 kGy。

危害： 

無(wú)害使用正常預(yù)防措施

處理： 

運(yùn)動(dòng)正常護(hù)理

存儲(chǔ)： 

在室溫下儲(chǔ)存

【詳細(xì)說明】

尼龍毛柱

　　尼龍毛柱是免疫學(xué)中一種用于分離T細(xì)胞的分離柱。憂郁在研究體內(nèi)及體外的免疫系統(tǒng)時(shí)，分離淋巴細(xì)胞群是一個(gè)關(guān)鍵步驟。而市場(chǎng)上并沒有針對(duì)B細(xì)胞的特異性抗血清，所以分離淋巴細(xì)胞中的T細(xì)胞并不是十分方便。T細(xì)胞尼龍毛分離法利用了尼龍毛對(duì)B細(xì)胞的親和力，從而使T細(xì)胞在沒有嚴(yán)重?fù)p傷的情況下達(dá)到的足夠的純度。該方法不像流式和磁珠費(fèi)用昂貴，而且操作簡(jiǎn)便，所需要的條件也不高，是一種非常實(shí)用的方法。

　　操作方法：

　　1.秤取1.5g尼龍毛裝入20-30ml玻璃容器或注射器內(nèi)，填料的體積控制在15毫升左右。因?yàn)槟猃埫乃删o關(guān)系到T細(xì)胞的回收率，所以要特別注意。注射器下端配接5厘米左右長(zhǎng)的帶有彈簧夾的橡皮管。

　　2. 加入大量的PBS平衡柱子后，用鋁箔包裹，并置于適當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi)，高壓滅菌15分鐘。

　　（商品化尼龍毛柱以上步驟可以省略，經(jīng)過PBS平衡后可以直接進(jìn)行下列步驟。）

　　3. 滅菌的尼龍毛柱垂直固定后放于超凈臺(tái)內(nèi)，頂部以鋁箔覆蓋，避免污染。

　　4. 注射器下端，橡皮管，彈簧夾用*消毒。打開彈簧夾調(diào)節(jié)流速在大約3-4ml/min。

　　5.首先，加入3-4倍柱體的無(wú)血培養(yǎng)基平衡，之后加入相同體積的含有血清的培養(yǎng)基平衡（上述培養(yǎng)基都要預(yù)熱），zui后等培養(yǎng)基液面接近柱填料液面時(shí)，關(guān)閉彈簧夾。

　　6. 樣本細(xì)胞懸浮液濃度控制在約5×108cells/ml，上樣量一般是1/3-1/5柱體積。樣品加入之后，再加入少量培養(yǎng)液，然后關(guān)閉彈簧夾。

　　7.覆蓋鋁箔，垂直固定，置于消毒過的容器中，于培養(yǎng)箱內(nèi)37℃孵育1小時(shí)。此過程中柱子必須要保持垂直狀態(tài)。

　　8. 從培養(yǎng)箱中拿出柱子，置于超凈臺(tái)內(nèi)，除去鋁箔。接上按照4.中的方法消毒的彈簧夾和橡皮管，加入適當(dāng)體積經(jīng)37℃預(yù)熱的培養(yǎng)基，打開彈簧夾控制流速在3-4 mL/min，流出約5ml之后，流出的培養(yǎng)液基變得不透明，此時(shí)其中含有T細(xì)胞，收集這一部分培養(yǎng)基。

　　9. 基本上何時(shí)結(jié)束收集取決于流出液體中細(xì)胞的濃度，實(shí)際上，收集的量達(dá)到一個(gè)柱體積時(shí)就可以停止收集，因?yàn)榧词故占嗟牧浚厥章蕩缀醪粫?huì)增加。

　　10.上述操作后，細(xì)胞的

　　回收率為： 15~20 ％

　　T細(xì)胞含量： 85~95 ％

　　B細(xì)胞污染率： 1 5 ％

　　多數(shù)細(xì)胞被確定為T細(xì)胞。

（注）收集粘附于尼龍毛上的細(xì)胞時(shí)，將T細(xì)胞收集完畢后的尼龍毛再無(wú)菌操作的狀態(tài)下取出，轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)娜萜髦校描囎有⌒牡膶⒛猃埫砷_，粘附的細(xì)胞可以洗到培養(yǎng)基中。或者將注射器芯插入注射器內(nèi)，通過壓力使的粘附的細(xì)胞隨著液體流出。

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